Նորություններ

Javascript-ը ներկայումս անջատված է ձեր դիտարկիչում:Այս կայքի որոշ գործառույթներ չեն աշխատի, եթե JavaScript-ն անջատված է:
Գրանցեք ձեր կոնկրետ մանրամասներով և հատուկ հետաքրքրություն ներկայացնող դեղամիջոցով, և մենք կհամապատասխանենք ձեր տրամադրած տեղեկությունները մեր լայնածավալ տվյալների բազայի հոդվածներին և անմիջապես կուղարկենք ձեզ PDF պատճենը:
Ding Jingnuo, Zhao Weifeng, Վարակիչ հիվանդությունների բաժանմունք, Սուչժոուի համալսարանի առաջին փոխկապակցված հիվանդանոց, Սուչժոու քաղաք, Jiangsu նահանգ, 215000 Հեռ.մարսողական համակարգի ուռուցքներ՝ 14,1% 5-ամյա ընդհանուր գոյատևմամբ:HCC-ով շատ հիվանդներ ախտորոշվում են առաջադեմ փուլում, ուստի վաղ սկրինինգը կարևոր է HCC-ից մահացությունը նվազեցնելու համար:Ի լրումն սովորաբար օգտագործվող հայտնաբերման ցուցիչների, ինչպիսիք են շիճուկի ալֆա-ֆետոպրոտեինը (AFP), ոսպնյակի լեկտին-ռեակտիվ ալֆա-ֆետոպրոտեինը (AFP-L3) և աննորմալ պրոտոմբինը (վիտամին K-ի անբավարարությունից առաջացած սպիտակուց II, PIVKA-II), հեղուկ բիոպսիայի տեխնիկան: Ապացուցված է, որ այն ախտորոշիչ նշանակություն ունի HCC-ի հայտնաբերման ժամանակ:Համեմատած ինվազիվ պրոցեդուրաների հետ՝ հեղուկ բիոպսիան կարող է հայտնաբերել շրջանառվող չարորակ մետաբոլիտները:Հեղուկ բիոպսիայի տեխնիկան հայտնաբերում է շրջանառվող ուռուցքային բջիջները, շրջանառվող ուռուցքի ԴՆԹ-ն, շրջանառվող ՌՆԹ-ն և էկզոսոմները և օգտագործվում են HCC-ի վաղ սկրինինգի, ախտորոշման և կանխատեսման համար:Այս հոդվածը վերանայում է մոլեկուլային կենսաբանությունը և հեղուկի բիոպսիայի տարբեր մեթոդների կիրառումը խոստումնալից բիոմարկերների մեկուսացման համար, որոնք կարող են կենսունակ տարբերակներ լինել HCC-ի վաղ գնահատման համար՝ բարձր ռիսկային HCC խմբերի վաղ սկրինինգը բարելավելու համար:Հիմնաբառեր՝ հեղուկ բիոպսիայի տեխնիկա, լյարդաբջջային քաղցկեղ, բարձր ռիսկային խումբ:
Հեպատոցելուլյար քաղցկեղը (HCC) մարսողական տրակտի տարածված չարորակ ուռուցք է, որը զբաղեցնում է վեցերորդ տեղը չարորակ ուռուցքների նոր դեպքերի շարքում ինչպես տղամարդկանց, այնպես էլ կանանց մոտ:1 Ամբողջ աշխարհում լյարդի քաղցկեղը քաղցկեղից մահացության երրորդ առաջատար պատճառն է թոքերի և կոլոռեկտալ քաղցկեղից հետո, որը կազմում է քաղցկեղի հետ կապված մահերի 8,3%-ը բոլոր չարորակ նորագոյացություններից:1 HCC-ի կանխատեսումը սերտորեն կապված է ախտորոշման փուլի հետ:HCC-ում վատ գոյատևման հիմնական պատճառներն են ներլյարդային մետաստազները, պորտալարային ուռուցքային թրոմբերը և հեռահար մետաստազները, որոնք բացառում են ռեզեկցիան, և այդ բնութագրերից շատերն արդեն առկա են հիվանդների մոտ ախտորոշման պահին:
Ախտորոշման և բուժման ուղեցույցների հիման վրա HCC-ի զարգացման հիմնական ռիսկի գործոններն են լյարդի ցիռոզը, քրոնիկ հեպատիտ B վիրուսը (HBV) կամ հեպատիտ C վիրուսը (HCV) վարակը, ալկոհոլային ճարպային լյարդի հիվանդությունը և ոչ ալկոհոլային ճարպային լյարդի հիվանդությունը (NAFLD): )2 Բացի այդ, HCC-ի ռիսկի գործոնները ներառում են աֆլատոքսինով աղտոտված սննդի ընդունումը, շիստոսոմիազը, ցիռոզի այլ պատճառները, լյարդի քաղցկեղի ընտանեկան պատմությունը, շաքարախտը, գիրությունը, ծխելը և թմրամիջոցների հետևանքով առաջացած լյարդի վնասվածքը:35 և 45 տարեկան բարձր ռիսկային խմբերը պետք է պարբերաբար բուժզննում անցնեն։Վաղ սկրինինգը վաղ բուժման կարևոր ռազմավարություն է՝ բարելավելու HCC-ով հիվանդների ընդհանուր գոյատևումը:
Բիոմարկերներ, ինչպիսիք են AFP, AFP-L3 և PIVKA-II, խորհուրդ են տրվում HCC3,4-ի վաղ սկրինինգի համար:Հեղուկ բիոպսիայի մեթոդները խոստումնալից արդյունքներ են ցույց տվել վաղ ախտորոշման և բուժման գնահատման հարցում:5,6 Զգալի առաջընթաց է գրանցվել HCC հեղուկ բիոպսիայում, որը կարող է ունենալ ավելի բարձր զգայունություն և առանձնահատկություն, քան սովորաբար օգտագործվող շիճուկային մարկերները, ինչպիսին է AFP-ն (Աղյուսակ 1):
AFP-ն լայնորեն կիրառվող բիոմարկեր է HCC-ում և ներկայումս առավել մանրամասն կենսամարկերն է, որը լայնորեն օգտագործվում է հիվանդության վաղ զննման, ախտորոշման և գնահատման համար:AFP-ի մշտական ​​բարձր մակարդակը համարվում է HCC-ի առաջընթացի ռիսկի գործոն:7,8 Փոքր լյարդային քաղցկեղի (sHCC) հայտնաբերման արագությունը մեծանում է ուլտրաձայնային և համակարգչային տոմոգրաֆիայի զարգացման հետ մեկտեղ, և պարզվել է, որ AFP-ն հատկապես անզգայուն է կլինիկական պրակտիկայում hHCC-ի հայտնաբերման նկատմամբ:Համաձայն հետահայաց բազմակենտրոն հետազոտության9, AFP դրական է հայտնաբերվել HCC դեպքերի 46% (616/1338) և sHCC դեպքերի 23.4% (150/641) դեպքում:Բացի այդ, AFP մակարդակը բարձրանում է լյարդի քրոնիկական հիվանդությամբ և ցիռոզով հիվանդների մոտ:10 Այսպիսով, AFP-ն ունի sHCC-ի սահմանափակ զննման ազդեցություն:11 Համաձայն Լյարդաբջջային քաղցկեղի Ասիա-Խաղաղօվկիանոսյան կլինիկական պրակտիկայի ուղեցույցների, AFP-ի օգտագործումը խորհուրդ չի տրվում:12 Կլինիկական ապացույցները ցույց են տալիս, որ PIVKA-II-ը գերազանցում է AFP-ին HCC-ի բուժման մեջ, և որ PIVKA-II-ի և AFP-ի համակցությունը ունի HCC-ում ավելի բարձր ախտորոշիչ արժեք:13 Հյուսվածքների բիոպսիայի համեմատ՝ հեղուկի բիոպսիան հիմնականում հայտնաբերում է ուռուցքի հետ կապված մետաբոլիտները մարմնի հեղուկներում (արյուն, թուք, պլևրալ հեղուկ, ողնուղեղային հեղուկ կամ մեզ) և ավելի քիչ ինվազիվ է հյուսվածքների համար:14 Բացի այդ, հեղուկ բիոպսիաները կարող են արտացոլել չարորակ հատկանիշներ, որոնք առկա չեն առաջնային ուռուցքային հյուսվածքում:15 Հեղուկ բիոպսիաները դեռևս չեն փորձարկվում կլինիկական պրակտիկայում բոլոր տեսակի ուռուցքների համար, սակայն դրանց ախտորոշիչ ներուժը քաղցկեղի դեպքում գրավում է ուռուցքաբանների ուշադրությունը:16 Հեղուկ բիոպսիան կարող է հայտնաբերել շրջանառվող ուռուցքային բջիջներ (CTCs), շրջանառվող ուռուցքային ԴՆԹ (cDNA), շրջանառվող ազատ ՌՆԹ (ecRNA) և էկզոսոմներ:Այս հոդվածում մենք կքննարկենք հեղուկի բիոպսիայի տարբեր մեթոդների բնութագրերը, դերը և կիրառումը բարձր ռիսկային HCC խմբերի վաղ սկրինինգում:
Առողջ անհատների արյան նմուշներում արտաբջջային ԴՆԹ (cfDNA) առաջին անգամ նկարագրվել է 1948 թվականին Մանդելի և այլոց կողմից:17 cfDNA-ն բջիջներից զերծ ԴՆԹ-ի հատված է, մոտավորապես 160–180 bp երկարությամբ, որը առաջանում է հիմնականում լիմֆոցիտներից և միելոիդ բջիջներից:ctDNA-ն ուռուցքային բջիջների կողմից ծայրամասային արյան մեջ թողարկված հատուկ մուտանտ ԴՆԹ-ի հատված է, որը ներկայացնում է ուռուցքային բջիջների գենոմային տեղեկատվությունը որոշակի պաթոֆիզիոլոգիական պրոցեսներից հետո, ներառյալ նեկրոզը, ապոպտոզը և արտազատումը:ctDNA-ի մասնաբաժինը ընդհանուր cfDNA-ում մեծապես տարբերվում է ուռուցքի տիպից, և cDNA բեկորները սովորաբար ունեն 167 bp-ից պակաս երկարություն:18 Underhill-ի ուսումնասիրությունը ցույց է տվել, որ cfDNA բեկորները սովորաբար ավելի կարճ են, քան նորմալ cfDNA:19 Առողջ անհատների համեմատ՝ քաղցկեղով հիվանդների արյան մեջ cfDNA բեկորների ընդհանուր երկարությունն ավելի կարճ է, ուստի cfDNA-ն կարող է օգտագործվել որպես ուռուցքի վաղ սկրինինգի ցուցիչ:cfDNA բեկորների երկարությունների որոշակի ենթաբազմությունների հարստացումը կարող է բարելավել cDNA-ի հայտնաբերումը, որը կապված է ոչ մետաստատիկ պինդ ուռուցքների հետ:Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ ctDNA-ն հայտնաբերված է ենթաստամոքսային գեղձի, հաստ աղիքի, միզապարկի, ստամոքս-աղիքային տրակտի, լյարդի, ձվարանների, կրծքագեղձի, մելանոմայի, ինչպես նաև գլխի և պարանոցի զարգացած քաղցկեղների ավելի քան 75%-ում:20,21 Այնուամենայնիվ, արյան մեջ ctDNA-ի քանակը կախված է ուռուցքի գտնվելու վայրից:22 Bettegoud-ի կատարած ուսումնասիրության ժամանակ կոլոռեկտալ, կրծքագեղձի, լյարդի, թոքերի և շագանակագեղձի քաղցկեղով հիվանդների մոտ հայտնաբերվել է cDNA-ի ավելի բարձր մակարդակ իրենց արյան մեջ, քան մյուս քաղցկեղները:Ի հակադրություն, բերանի խոռոչի, ենթաստամոքսային գեղձի, ստամոքսի և գլիոմայի քաղցկեղով հիվանդների մոտ cDNA-ի կոնցենտրացիան արյան մեջ ավելի ցածր է եղել:քսանմեկ
Քանի որ ctDNA-ն պարունակում է նույն գենետիկ մուտացիաները, ինչ առաջնային ուռուցքային բջիջները, cDNA-ն կարող է օգտագործվել ուռուցքին հատուկ մուտացիաներ և էպիգենետիկ փոփոխություններ հայտնաբերելու համար, ներառյալ մեթիլացումը, հիդրօքսիմեթիլացումը, մեկ նուկլեոտիդային տատանումները և պատճենների թվի տատանումները:քսաներեք
ԴՆԹ մեթիլացումը ամենատարածված էպիգենետիկ փոփոխություններից մեկն է, որը հանգեցնում է գեների ռեպրեսիայի:Համեմատած նորմալ բջիջների հետ, կան ուռուցքային բջիջների գենոմի մեթիլացման ընդհանուր մակարդակի տարբերություններ, հատկապես ուռուցքային ճնշող գեների մեթիլացման մեջ, որը կարելի է հայտնաբերել վաղ փուլում, ինչը ենթադրում է, որ ԴՆԹ-ի մեթիլացման փոփոխությունները կարող են վաղաժամ ցուցիչ լինել: ուռուցքի առաջացման հայտնաբերում.Ուռուցք ճնշող գեները, որոնք կապված են HCC-ի հետ, կարող են ապաակտիվացվել պրոմոտոր մեթիլացիայի միջոցով՝ դրանով իսկ խթանելով ուռուցքի առաջացումը:24 ԴՆԹ-ի մեթիլացումը իդեալական մարկեր է ուռուցքների վաղ ախտորոշման համար՝ շնորհիվ իր հյուսվածքների յուրահատկության, հայտնաբերման և տարիքային անկախության:Բացի այդ, ԴՆԹ-ի մեթիլացումը ավելի տարածված է սոմատիկ մուտացիաների համեմատ, քանի որ թիրախ գենոմի յուրաքանչյուր շրջանում կան ավելի շատ թիրախային շրջաններ և մի քանի փոփոխված CpG տեղանքներ:25 Բացի բազմաթիվ CpG տեղամասերից, մեծ թվով անկախ հիպերմեթիլացված տեղանքներ ctDNA-ում հայտնաբերվել են DBX2, THY1, MT1M, INK4A, VIM, FBLN1 և RGS10.26 Xu et al.1098 HCC հիվանդների և 835 առողջ հսկողության cfDNA նմուշների համեմատությունը, որոնց գեները կապված են HCC-ի հետ, պարզվել է, որ խիստ փոխկապակցված են պլազմայի cDNA-ի համապատասխան մեթիլացման ստորագրությունների հետ:25 Լաբորատոր վերլուծության հիման վրա մշակվել է կանխատեսող մոդել, որը պարունակում է 10 մեթիլացման մարկերներ՝ համապատասխանաբար 85,7% և 94,3% զգայունությամբ և յուրահատկությամբ, և այդ մարկերները մեծապես փոխկապակցված են ուռուցքի զանգվածի, ուռուցքի փուլի և բուժման արձագանքման հետ:Այս արդյունքները ցույց են տալիս, որ cDNA մեթիլացման մարկերների օգտագործումը մեծ խոստումնալից է HCC-ի ախտորոշման, մոնիտորինգի և կանխատեսման գործում:Մեթիլացման մոդելում, որը բաղկացած է երեք շեղված մեթիլացված գեներից (APC, COX2, RASSF1A) և մեկ miRNA (miR203)՝ ներկայացված Lu et al27-ի կողմից, HBV-ի հետ կապված HCC ախտորոշելու համար 27 մոդելի զգայունությունն ու առանձնահատկությունը համադրելի էին:80%:Բացի այդ, մոդելը կարող է հայտնաբերել չախտորոշված ​​HCC հիվանդների 75%-ը՝ AFP 20 նգ/մլ մակարդակով:Ras-ի հետ կապված տիրույթի ընտանիքի 1A սպիտակուցի (RASSF1A) գենը մարդու գենոմում ԴՆԹ-ի հիմնական կրկնվող հաջորդականությունն է:Araujo et al.եզրակացրեց, որ RASSF1A պրոմոտորի հիպերմեթիլացումը կարող է արժեքավոր բիոմարկեր հանդիսանալ HCC-ի վաղ սկրինինգի համար և պոտենցիալ մոլեկուլային թիրախ էպիգենետիկ թերապիայի համար:28 Մեկ ուսումնասիրության ժամանակ շիճուկի RASSF1A խթանիչի հիպերմեթիլացում հայտնաբերվել է HCC-ով հիվանդների 73.3%-ի մոտ:29 Երկար ցրված նուկլեոտիդային տարր 1 (LINE-1) ևս մեկ բարձր ակտիվ ռետրոտրանսպոզիցիոն միջնորդ է:LINE-1-ի հիպոմեթիլացումը հայտնաբերվել է HCC շիճուկի նմուշների 66,7%-ի ԴՆԹ-ում և կապված է վաղ ռեցիդիվների և վատ գոյատևման հետ արմատական ​​ռեզեկցիայից հետո:29 Հիպերմեթիլացումը տարածված գենետիկ պրոցես է, որը յուրահատուկ դեր է խաղում լյարդի ցիռոզի և HCC-ի զարգացման մեջ:Ի հակադրություն, հիդրօքսիմեթիլացումը դեմեթիլացման գործընթաց է, որը հրահրում է գենի վերաակտիվացում և արտահայտում, և այս գործընթացում 5-հիդրօքսիմեթիլցիտոզինի (5-hmC) արտադրանքի հայտնաբերումը կարող է օգտագործվել ուռուցքը նույնականացնելու համար:cDNA-ի մեթիլացումը և հիդրօքսիմեթիլացումը կապված են ուռուցքի առաջացման հետ և կարող են նպաստել HCC-ի վաղ սկրինինգին:2554 սուբյեկտների ուսումնասիրության ժամանակ cfDNA-ի նմուշներում հայտնաբերվել են 31 գենոմի լայնածավալ 5-hmCs, և 32 գեն է հայտնաբերվել՝ համեմատելով 5-hmC հաջորդականությունը HCC հիվանդների և բարձր ռիսկային խմբերի, ինչպիսիք են քրոնիկական հիվանդություններ ունեցողները:Լյարդի հիվանդությունների ախտորոշիչ մոդելներ.և ցիռոզ.Այս մոդելը գերազանցում էր AFP-ին HCC-ն ոչ ուռուցքային հյուսվածքից տարբերելու հարցում:
Կոդավորման շրջաններում մուտացիաները կարող են հանգեցնել տրանսկրիպցիոն աննորմալությունների, ինչը կարող է հանգեցնել սպիտակուցի հաջորդականության փոփոխության և, ի վերջո, քաղցկեղի:Մեկ նուկլեոտիդային տարբերակները կարևոր գենոմային մարկերներ են ուռուցքի վաղ սկրինինգի համար՝ շնորհիվ իրենց հյուսվածքների բարձր հուսալիության և ուռուցքի և հյուսվածքների բարձր յուրահատկության:Բազմաթիվ HCC-ի հետ կապված ուսումնասիրություններ, օգտագործելով հաջորդ սերնդի հաջորդականությունը (NGS) քաղցկեղի էքսոմի և ամբողջ գենոմի հաջորդականության համար, հայտնաբերել են ընդհանուր մուտացված բջջային գեներ, ինչպիսիք են TP53 և CTNNB1, ինչպես նաև մի քանիսը, ներառյալ ARID1A, MLL, IRF2:Նոր գեները՝ ATM, CDKN2A, FGF19, PIK3CA, RPS6KA3 և JAK1, ցույց են տալիս մուտացիայի չափավոր արագություն: Մուտանտ գենի ֆունկցիայի վերլուծությունը ցույց է տալիս, որ փոփոխություններ քրոմատինի վերափոխման, Wnt/β-catenin և JAK/STAT ազդանշանների փոխակերպման, P53-բջջային ցիկլի ուղու, էպիգենետիկ փոփոխիչների, օքսիդատիվ սթրեսի ուղիների, PI3K/AKT/MTOR ուղու և RAS/RAF/ MAPK kinase ուղին վճռորոշ դեր է խաղում HCC օնկոգենեզում:32,33 Ուսումնասիրության մեջ, որտեղ հայտնաբերվել են ուռուցքի հետ կապված մուտացիաներ, Հուանգը և ուրիշները պարզել են, որ ctDNA-ից կախված ուռուցքի հետ կապված մուտացիաների հաճախականությունը կազմում է 19,5%, իսկ յուրահատկությունը՝ 90%: .34 Բացի այդ, անոթային ներխուժման փորձ ունեցող հիվանդների մոտ ավելի հավանական է ctDNA մուտացիաներ (P=0.041) և ավելի կարճ ռեցիդիվից ազատ գոյատևում (P<0.001): Մուտանտ գենի ֆունկցիայի վերլուծությունը ցույց է տալիս, որ փոփոխություններ քրոմատինի վերափոխման, Wnt/β-catenin և JAK/STAT ազդանշանների փոխակերպման, P53-բջջային ցիկլի ուղու, էպիգենետիկ փոփոխիչների, օքսիդատիվ սթրեսի ուղիների, PI3K/AKT/MTOR ուղու և RAS/RAF/ MAPK kinase ուղին վճռորոշ դեր է խաղում HCC օնկոգենեզում:32,33 Ուսումնասիրության մեջ, որտեղ հայտնաբերվել են ուռուցքի հետ կապված մուտացիաներ, Հուանգը և ուրիշները պարզել են, որ ctDNA-ից կախված ուռուցքի հետ կապված մուտացիաների հաճախականությունը կազմում է 19,5%, իսկ յուրահատկությունը՝ 90%: .34 Բացի այդ, անոթային ներխուժման փորձ ունեցող հիվանդների մոտ ավելի հավանական է ctDNA մուտացիաներ (P=0.041) և ավելի կարճ ռեցիդիվից ազատ գոյատևում (P<0.001):Մուտանտ գենի ֆունկցիայի վերլուծությունը ցույց է տալիս, որ փոփոխություններ քրոմատինի վերափոխման, Wnt/β-catenin և JAK/STAT ազդանշանների, P53 բջջային ցիկլի ուղու, էպիգենետիկ փոփոխիչների, օքսիդատիվ սթրեսի ուղիների, PI3K/AKT/MTOR ուղու և RAS/RAF/MAPK կինազային ուղիների փոփոխություններում: կարևոր դեր է HCC ուռուցքի առաջացման մեջ:32,33 Ուսումնասիրության մեջ, որը հայտնաբերել է ուռուցքի հետ կապված մուտացիաներ, Huang et al.պարզել է, որ ctDNA-ից կախված ուռուցքի հետ կապված մուտացիաների հաճախականությունը կազմում է 19,5%, իսկ սպեցիֆիկությունը՝ 90%:.34 Кроме того, у пациентов с сосудистой инвазией чаще встречались мутации цДНК (P=0,041) и более короткая безрецидивная выживаемость (P<0,001): .34 Բացի այդ, անոթային ինվազիայով հիվանդներն ունեին ավելի շատ cDNA մուտացիաներ (P=0.041) և ավելի կարճ՝ առանց հիվանդությունների գոյատևման (P<0.001):Մուտանտ գեների ֆունկցիոնալ վերլուծությունը բացահայտեց քրոմատինի վերափոխում, Wnt/β-catenin և JAK/STAT ազդանշաններ, P53 բջջային ցիկլի ուղի, էպիգենետիկ փոփոխիչներ, օքսիդատիվ սթրեսի ուղի, PI3K/AKT/MTOR ուղի և RAS/RAF/MAPK: kinase ուղին կարևոր դեր է խաղում HCC-ի օնկոգենեզում: 32,33 在 一 项 检测 到 中 研究 研究 研究 研究 等 等 的 的 的 的 的 的 的 的 19.5% .34 此外, 经历 血管 侵犯 的 患者 更 可能 发生 CTDNA突变（P=0.041）和更短的无复发生存期（P<0.001）。 32.33 在 一 项 检测 到 相关 突变 的 研究, Huang 等 发现 肿瘤 相关 突变 突变 为 90% .34 此外 经历 血管 侵犯 的 更 可能 发生 CTDNA 突变 (p = 0.041) 和短的无复发生存期（P<0.001）։32,33 Ուսումնասիրության մեջ, որը հայտնաբերել է ուռուցքի հետ կապված մուտացիաներ, Huang et al.պարզվել է, որ ուռուցքի հետ կապված մուտացիաները 19,5%-ով կախված են cDNA-ից՝ 90% յուրահատկությամբ:мутация (P = 0,041) и более короткая безрецидивная выживаемость (P <0,001): մուտացիա (P=0.041) և ավելի կարճ՝ առանց հիվանդությունների գոյատևման (P<0.001):Մեկ այլ տարածված HCC շարժիչ գենը TP53-ն է, որն ունի ավելի քան 30% մուտացիայի մակարդակ:Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ արյան և մեզի ctDNA-ի TP53 մուտացիաների հաճախականությունը տատանվում է 5%-ից մինչև 60%:35 Յոհանի ուսումնասիրությունը ցույց է տվել, որ ctDNA մուտացիայի սպեկտրը ուշ HCC-ում ունի մուտացիայի նման արագություն վաղ HCC-ի հետ, ներառյալ TERT խթանիչը (51%), TP53 (32%), CTNNB1 (17%), PTEN (8%), մուտացիաները: AXIN1 ., ARID2, KMT2D և TSC2 (յուրաքանչյուրը 6%):36 β-catenin (CTNNB1) օնկոգենը կարևոր դեր է խաղում Wnt ազդանշանային ուղու մեջ:Տրանսկրիպցիոն կոակտիվատորը CTNNB1 կարող է խթանել գեների արտահայտումը, ինչը կարող է հանգեցնել բջիջների բազմացման, ապոպտոզի արգելակման և անգիոգենեզի:CTNNB1-ը կարող է նաև փոխազդել TERT-ի հետ՝ հրահրել հեպատոցիտների փոխակերպումը:33 TERT պրոմոտորը հաճախ մուտացիայի է ենթարկվում որոշ պինդ ուռուցքներում:TERT-ի փոփոխությունները՝ HCC-ի չարորակ փոխակերպման ամենավաղ գենետիկական փոփոխություններից մեկը, կարող է հանգեցնել տելոմերազի վերաակտիվացմանը ցիռոզ հեպատոցիտներում և կարող է նպաստել տարածմանը և կանխել ծերացումը:Հաղորդվել է, որ 33-37 TERT պրոմոտորի մուտացիաները տեղի են ունենում լյարդի պրոլիֆերատիվ հանգույցներով և վաղ HCC-ով հիվանդների 59-90%-ի մոտ և կապված են գոյատևման հետ:38
Պատճենների թվի փոփոխությունները (CNA) սոմատիկ մուտացիաների կարևոր ենթատեսակ են:Հետազոտությունները ցույց են տվել, որ CNA-ի համատարած և կիզակետային ծանրաբեռնվածությունը գենոմային նշան է, որը կարող է կանխատեսել ուռուցքի իմունային ինֆիլտրացիան և բացառումը քաղցկեղի որոշ տեսակների դեպքում:39 Ակտիվ ինֆիլտրացիայի ազդանշան, բարձր ցիտոլիտիկ ակտիվություն, ծանր բորբոքում և գենետիկական մարկերներ, որոնք կապված են HCC-ում հակագենի ներկայացման հետ:477 սուբյեկտների մեկ նուկլեոտիդային պոլիմորֆիզմների տվյալների զանգվածի վերլուծությունը ցույց տվեց ցածր ծանրաբեռնվածություն Կենտրոնական նյարդային համակարգի վրա:Ի հակադրություն, քրոմոսոմային անկայուն ուռուցքները բարձր ընդարձակ CNA բեռով ցույց տվեցին իմունային մերժման նշաններ և կապված էին տարածման, ԴՆԹ վերականգնման և TP53 դիսֆունկցիայի հետ:Xu et al.ցույց է տվել, որ HCC խումբն ուներ CNA-ի ավելի բարձր միավորներ, քան լյարդի քրոնիկ հիվանդությունների խումբը:40 Օգտագործելով մեկ բջջի ամբողջական գենոմի հաջորդականությունը, պարզվեց, որ CNA-ները հայտնվում են լյարդի կարցինոգենեզի վաղ շրջանում և մնում են համեմատաբար կայուն ուռուցքի առաջընթացի ընթացքում:41 Chung et al.պարզվել է, որ cfDNA մակարդակները զգալիորեն բարձրացել են HCC հիվանդների մոտ, և որ cfDNA-ում գենոմի լայնածավալ CNA-ները կարևոր անկախ կանխագուշակող մարկեր են HCC հիվանդների մոտ, ովքեր բուժում են սորաֆենիբով:42 CNA-ի ավելի բարձր ծանրաբեռնվածություն ունեցող հիվանդների մոտ հիվանդության առաջընթացը և մահը ավելի հավանական է, քան ավելի ցածր CNA ծանրաբեռնվածություն ունեցող հիվանդները:Ollerich et al.պարզվել է, որ պատճենների թվի անկայունության ինդեքսը (CNI) կարող է օգտագործվել քաղցկեղով հիվանդների cfDNA-ում CNA-ն գնահատելու համար:Նրանք նշեցին, որ առաջադեմ քաղցկեղով հիվանդներն ունեին զգալիորեն ավելի բարձր CNI միավորներ, քան վերահսկիչ խումբը, որը գնահատում է հիվանդի արձագանքը համակարգային քիմիաթերապիայի և իմունոթերապիայի նկատմամբ:43 Այս արդյունքները ցույց են տալիս, որ հեղուկ բիոպսիայի նմուշներում հայտնաբերված CNA-ները կարող են ծառայել որպես կանխագուշակող ցուցիչներ՝ զարգացած քաղցկեղով հիվանդների մոտ:HCC համակարգային թերապիայի ֆոնի վրա.
Ներկայումս ctDNA-ի հայտնաբերման համար օգտագործվող մեթոդները կարելի է բաժանել նպատակային և ոչ նպատակային մեթոդների:Համառոտ, թիրախային մեթոդները, ինչպիսիք են թվային պոլիմերազային շղթայական ռեակցիան (dPCR), BEAMing digital PCR, Amplification Refractory Mutation System-PCR, Capp-Seq և Tam-Seq, խիստ զգայուն են նախապես սահմանված գեների նկատմամբ:Ոչ նպատակային մեթոդները, ինչպիսիք են ամբողջ գենոմի հաջորդականությունը և NGS-ը, ապահովում են ամբողջ գենոմային լանդշաֆտի համապարփակ պատկերացում:44 Թիրախային վահանակների համեմատությամբ՝ ամբողջ գենոմի հաջորդականությունը կարող է հայտնաբերել ոչ միայն կետային մուտացիաները և ներդիրները, այլև վերադասավորումները և պատճենների թվի տատանումները:կանխատեսումը, իսկ CTC-ն և cfDNA-ն լավ ցուցանիշներ են, որոնք կարող են օգտագործվել HCC-ի դինամիկ մոնիտորինգի համար:45 Բացի այդ, cfDNA վերլուծությունը կարող է ավելի օգտակար լինել HCC-ի հայտնաբերման համար:Յան և այլք։ցույց է տվել, որ cfDNA-ն HCC-ով հիվանդների պլազմայում զգալիորեն ավելի բարձր է եղել, քան լյարդի ֆիբրոզով և առողջ վերահսկվող հիվանդների մոտ:Համեմատած AFP-ի հետ, ակնկալվում է, որ ctDNA-ն ավելի լավ սքրինինգային նշիչ կլինի վաղ HCC-ի համար:46 47 հեղուկ բիոպսիաների հեռանկարային ուսումնասիրության ժամանակ, որոնք փորձարկել են cfDNA-ն և սպիտակուցը բնակչության պոպուլյացիայի մեջ, ցույց է տրվել, որ դրանք արդյունավետ են տարբերելու HCC ունեցող հիվանդներին առանց HCC հիվանդների:331 նորմալ և AFP-բացասական ուլտրաձայնային հետազոտության ժամանակ cfDNA-ի զգայունությունն ու յուրահատկությունը HCC-ի ախտորոշման համար համապատասխանաբար կազմում էին 100% և 94%, այնպես որ cDNA-ն կարող էր հայտնաբերել HCC-ն ասիմպտոմատիկ HBsAg սերոդրական անհատների մոտ:Yeo48 հետազոտության ընթացքում հայտնաբերվել է RASSF1A խթանիչի հիպերմեթիլացման բարձր հաճախականություն (92,5%) HCC-ով հիվանդների մոտ:Բացի այդ, Xu et al.ստեղծել է ախտորոշիչ մոդել՝ HCC-ի կանխատեսման համար՝ օգտագործելով հատուկ մեթիլացման մարկերների վահանակ՝ համապատասխանաբար 90,5% և 83,3% յուրահատկությամբ և զգայունությամբ:Վահանակը թույլ է տալիս HCC-ով հիվանդներին տարբերել լյարդի այլ հիվանդություններով հիվանդներից, ինչը ավելի լավ է, քան AFP-ն:Նրանք նաև պարզեցին, որ նորմալ հսկիչները, որոնք դրական են եղել, կարող են ունենալ HCC-ի համար ռիսկի գործոններ, ինչպիսիք են HBV վարակը կամ ալկոհոլի օգտագործման պատմությունը:25 Մենք ենթադրում ենք, որ HCC-ի համար բարձր ռիսկային գործոնները կարող են խթանել cfDNA-ի հիպերմեթիլացումը, որն այնուհետև նպաստում է HCC-ի առաջընթացին, և, հետևաբար, cfDNA-ն կարող է առանցքային դեր խաղալ բարձր ռիսկային խմբերի սկրինինգում:Cai et al.ամփոփել ctDNA մուտացիաների ամբողջ շրջանակը և առաջարկել հիվանդների մոտ ուռուցքային բեռը գնահատելու կայուն ռազմավարություն:49 Այս ռազմավարությունը կարող է բացահայտել ուռուցքի առաջացումը միջինը 4,6 ամիս առաջ պատկերային փոփոխությունից և ցույց է տվել բարձր ախտորոշիչ արդյունավետություն՝ համեմատած AFP, AFP-L3 և PIVKA-II շիճուկի կենսամարկերների հետ:cDNA թեստավորման ախտորոշիչ արժեքը ցուցադրվել է, երբ պատկերի գնահատումը հասանելի չէ, ուստի cDNA թեստն արժեք ունի բարձր ռիսկային խմբերում վաղ HCC-ի ախտորոշման համար:Վերջերս գիտնականներն օգտագործեցին NGS տեխնոլոգիան՝ 3204 կլինիկական նմուշներում և cfDNA-ում վերլուծելու բազմաչափ գենետիկ փոփոխության ցուցանիշները (ներառյալ 5-հիդրօքսիմեթիլցիտոզին, 5'-մոտիվը, մասնատումը, նուկլեոսոմի հետքը, HIFI):50 Վերահաստատված HIFI մոդելները երեք անկախ գնացքների, թեստային և թեստային հավաքածուներով ցույց տվեցին կայուն և հուսալի խտրականություն HCC և ոչ HCC պոպուլյացիաների միջև՝ համապատասխանաբար 95,79% և 95,42% զգայունությամբ HCC-ին հատուկ թեստային և թեստային հավաքածուներում:Սեռերը կազմել են համապատասխանաբար 95,00% և 97,83%։HIFI մեթոդի ախտորոշիչ արժեքը ավելի բարձր է, քան AFP-ն՝ HCC-ն ցիռոզից տարբերելու հարցում:Բացի այդ, ctDNA-ն օգտագործվում է նաև վիրաբուժական բուժման մեջ:Ացուշին և այլք։որոշեց նախավիրահատական ​​ctDNA-ի շիճուկ մակարդակները HCC-ով հիվանդների մոտ և պարզեց, որ ռեցիդիվների և արտալյարդային մետաստազների մակարդակը cDNA դրական խմբում զգալիորեն ավելի բարձր էին, քան cDNA բացասական խմբում, և cDNA մակարդակները զգալիորեն փոխկապակցված էին:ուռուցքի առաջընթացով.51 Լինելով խիստ զգայուն բիոմարկեր՝ ctDNA-ն կարող է կանխատեսել HCC-ի անոթներ ներխուժելու ունակությունը:Wang et al.կատարվել է HCC-ով 46 հիվանդի ամբողջ գենոմի հաջորդականությունը, և բազմաչափ վերլուծությունը ցույց է տվել, որ cDNA տարբերակի ալելային հաճախականության շեմային արժեքը միկրոանոթներ ներխուժելու համար կազմում է 0,83%, զգայունությունը 89,7% և սպեցիֆիկությունը 80,0%:ռեզեկցիոն HCC-ում միկրոանոթային ներխուժման անկախ ռիսկի գործոն, որը ենթադրում է, որ cDNA-ն կարող է օգնել օպտիմալ բուժման ուղղորդմանը:Եզրափակելով, ctDNA-ն լիովին ներգրավված է HCC-ի առաջացման և զարգացման մեջ և կարող է օգտագործվել վաղ սկրինինգի, վիրաբուժական գնահատման և հիվանդության մոնիտորինգի համար:
CTC-ները չարորակ բջիջներ են, որոնք առաջանում են առաջնային ուռուցքներից կամ մետաստազներից, որոնք մետաստազավորում են արյան մեջ:Ուռուցքային բջիջները արտազատում են մատրիցային մետալոպրոտեինազներ (MMPs), որոնք քայքայում են նկուղային թաղանթը` թույլ տալով ուռուցքային բջիջներին ուղղակիորեն մտնել արյան և ավշային անոթներ:Այնուամենայնիվ, CTC-ների մեծ մասը արագորեն վերացվում է անոյիկներով, իմունային հարձակմամբ կամ կտրող սթրեսով:53 Էպիթելային-մեզենխիմալ անցումը (EMT) թույլ է տալիս CTC-ներին հեշտությամբ մեկուսացնել առաջնային ուռուցքային հյուսվածքից, ներխուժել մազանոթներ և ձեռք բերել զգալիորեն բարելավված գոյատևում, մետաստազներ, ինվազիվություն և դեղամիջոցների դիմադրություն:Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ առաջնային մետաստատիկ ուռուցքների տարբեր ուռուցքային բջիջների միջև առկա է խորը տարասեռություն:Այսպիսով, CTC վերլուծությունը կարող է հանգեցնել ուռուցքային բջիջների տարասեռության համապարփակ ըմբռնմանը:54
HCC-ի հետ կապված CTC-ների հատուկ մարկերները ներառում են գլիպիկան-3 (GPC3), ասիալոգլիկոպրոտեինի ընկալիչ (ASGPR), էպիթելային բջիջների կպչունության մոլեկուլ (EpCAM) և ցողունային բջիջների հետ կապված մարկերներ, ինչպիսիք են CD44, CD90, 55 և միջբջջային կպչունության մոլեկուլը (ICAM1):) .56 GPC3 մարկերը բջջային թաղանթով խարսխված սպիտակուց է, որը կլինիկորեն օգտագործվում է HCC-ի պաթոլոգիական վերլուծության և բնութագրման համար:57 GPC3-ի արտահայտումն ավելի տարածված է միջանկյալ և ցածր դիֆերենցիայով HCC ուռուցքային բջիջներում և խթանում է արտալյարդային միգրացիան;Բացի այդ, GPC3+ CTC-ների առկայությունը վկայում է մետաստատիկ HCC-ի մասին:58 ASGPR-ը տրանսմեմբրանային սպիտակուց է, որն արտահայտվում է միայն հեպատոցիտների մակերեսին և բարձր արտահայտված է լավ տարբերակված HCC-ում:EpCAM-ը մեմբրանի հետ կապված ամենաշատ օգտագործվող սպիտակուցներից մեկն է CTC-ները գրավելու համար:EpCAM-ը ճանաչվել է որպես ցողունային բջիջների բնութագրիչներով HCC բջիջների մակերեսային մարկեր59, որը փոխկապակցված է HCC-ի տարբեր կլինիկոպաթոլոգիական առանձնահատկությունների հետ, ինչպիսիք են անոթային ներխուժումը, գնահատված AFP մակարդակները և լյարդի քաղցկեղի առաջադեմ փուլը Բարսելոնայի հիվանդանոցում (BCLC):60 CTC EMT ֆենոտիպը շատ մետաստատիկ է:54 EMT պրոցեսները CTC-ում նպաստում են HCC մետաստազին:EMT մարկերների արտահայտությունը, ինչպիսիք են vimentin, twist, E-box zinc finger binding (ZEB) 1, ZEB2, snail, slug և E-cadherin, ուսումնասիրվել են HCC հիվանդների լյարդից ստացված CTC-ներում:58 Չենգի կողմից մշակված CanPatrol™ համակարգը CTC-ները դասակարգեց երեք ֆենոտիպային ենթախմբերի՝ հիմնվելով հիմնականում արտահայտված մարկերների վրա՝ էպիթելային ֆենոտիպ (EpCAM, CK8/18/19), մեզենխիմային ֆենոտիպ (վիմենտին, ոլորված) և խառը ֆենոտիպեր։176 հիվանդների մոտ ընդհանուր CTC-ն գերազանցում էր AFP-ին HCC-ն լյարդի բարորակ հիվանդությունից տարբերելու հարցում:AUC արժեքները ընդհանուր CTC-ի, AFP-ի և համակցված ընդհանուր CTC-ի և AFP-ի համար եղել են 0,774 (95% CI, 0,704–0,834), 0,669 (95% CI, 0,587–0,750) և 0,821 (95% CI, 0,704–0,834), և 0,821 (95% CI, 0,76–0,75%): )), համապատասխանաբար։CTC դասակարգումը, որը հիմնված է EMT-ի վրա, կարող է կանխատեսել HCC ախտորոշումը, վաղ ռեցիդիվը, մետաստազները և ավելի կարճ ընդհանուր ժամանակը:
Ներկայումս CSC-ների հայտնաբերման մեթոդները ներառում են ֆիզիկական և կենսաբանական մեթոդներ:Ֆիզիկական մեթոդները, որոնք հաճախ կոչվում են կենսաֆիզիկական հատկությունների վրա հիմնված հարստացում, հիմնականում կախված են CSC-ի ֆիզիկական հատկություններից, ինչպիսիք են չափը, խտությունը, լիցքը, շարժունակությունը և դեֆորմացիան:Կախված ֆիզիկական հատկություններից, կան տարբեր մեթոդներ, ինչպիսիք են ֆիլտրացման վրա հիմնված համակարգերը, դիէլեկտրոֆորեզը և այլն: Վերջինս, որը նաև հայտնի է որպես իմունային հարստացում, հիմնված է հիմնականում հակագեն-հակամարմին կապի վրա, քանի որ մեթոդը օգտագործում է հակամարմիններ ուռուցքային հատուկ բիոմարկերների դեմ: ինչպիսիք են EpCAM, ASGPR, մարդու էպիդերմիսի աճի գործոնի ընկալիչ 2 (HER2), շագանակագեղձի հատուկ հակագեն (PSA), մարդկային պանսիտոկերատին (P-CK) և կարբամոիլ ֆոսֆատ սինթազ 1 (CPS1):62 Մեկ այլ տեսակ, որը կոչվում է ոչ հարստացման մեթոդ, օգտագործում է հոսքի ցիտոմետրիա՝ CTC-ները լեյկոցիտներից տարբերելու համար՝ հիմնվելով միջուկ-ցիտոպլազմային ավելի բարձր հարաբերակցության և չափի վրա:Ներկայումս FDA-ի կողմից հաստատված միակ թեստը CTC-ների հայտնաբերման համար Cell-Search™ համակարգն է, որն օգտագործում է EpCAM բջջային մակերեսի մարկերը: Այնուամենայնիվ, համակցված մարկերների վրա հիմնված CTC հայտնաբերումը կարող է մեծացնել դրականության մակարդակը:54 ASGPR-ի և CPS1-ի դեմ հակամարմինների խառնուրդը հասել է 91% CTC-ի հայտնաբերման մակարդակի HCC հիվանդների մոտ: -CK և CPS1, և տարբերակեց HCC հիվանդներին լյարդի բարորակ հիվանդությամբ կամ ոչ HCC քաղցկեղով 100%:64 Վանգի ուսումնասիրությունը հայտնաբերել է EpCAM+ CTCs 42 HCC հիվանդների 60%-ի մոտ և հայտնաբերել էական կապեր երկուսի դրականության միջև: տոկոսադրույքը և TNM փուլով CTC-ների քանակը:65 Guo et al-ը պարզել է, որ CTC-ից ստացված PCR գնահատականը բարձրացել է 125/171 (73%) հիվանդների մոտ, որոնց AFP մակարդակը եղել է <20 նգ/մլ՝ 72,5% զգայունությամբ և սպեցիֆիկությունը 95,0%, համեմատած AFP-ի 57,0%-ի և 90,0%-ի հետ՝ 20 նգ/մլ կտրվածքով:66 AFP-ի և CTC-ների համադրությունը կարող է բարելավել HCC-ի հայտնաբերումը: բարձր ռիսկային է HCC-ի համար: Այնուամենայնիվ, համակցված մարկերների վրա հիմնված CTC հայտնաբերումը կարող է մեծացնել դրականության մակարդակը:54 ASGPR-ի և CPS1-ի դեմ հակամարմինների խառնուրդը հասել է 91% CTC-ի հայտնաբերման մակարդակի HCC հիվանդների մոտ: -CK և CPS1, և տարբերակեց HCC հիվանդներին լյարդի բարորակ հիվանդությամբ կամ ոչ HCC քաղցկեղով 100%:64 Վանգի ուսումնասիրությունը հայտնաբերել է EpCAM+ CTCs 42 HCC հիվանդների 60%-ի մոտ և հայտնաբերել էական կապեր երկուսի դրականության միջև: տոկոսադրույքը և TNM փուլով CTC-ների քանակը:65 Guo et al-ը պարզել է, որ CTC-ից ստացված PCR գնահատականը բարձրացել է 125/171 (73%) հիվանդների մոտ, որոնց AFP մակարդակը եղել է <20 նգ/մլ՝ 72,5% զգայունությամբ և սպեցիֆիկությունը 95,0%, համեմատած AFP-ի 57,0%-ի և 90,0%-ի հետ՝ 20 նգ/մլ կտրվածքով:66 AFP-ի և CTC-ների համադրությունը կարող է բարելավել HCC-ի հայտնաբերումը: HCC-ի համար բարձր ռիսկի տակ:Այնուամենայնիվ, մարկերի վրա հիմնված CTC-ների համակցված հայտնաբերումը կարող է մեծացնել դրական արդյունքների տոկոսը:54 Հակաս-ASGPR և CPS1 հակամարմինների խառնուրդը հասել է CTC-ի հայտնաբերման 91% մակարդակի HCC-ով հիվանդների մոտ:63 Zhang et al.օգտագործել է CTC-Chip հակամարմիններ ASGPR-ի, P-CK-ի և CPS1-ի դեմ, ինչպես նաև տարբերել է HCC-ով հիվանդներին լյարդի բարորակ հիվանդությամբ կամ ոչ-HCC-ով 100%-ով:частота и количество ЦОК со стадией TNM.65 Guo и соавторы обнаружили, что показатель ПЦР, полученный из ЦОК, был повышен у 125/171 (73%) пациентов, у которых чувствитель уень А20% и специјалность 95,0% по сравнению с 57,0% и 90,0% за АФП при пороговом уровне 20 нг/мл. խումբ. TNM փուլով CTC-ների հաճախականությունը և քանակը:65 Guo et al-ը պարզել է, որ CTC-ից ստացված PCR-ն բարձրացել է 125/171 (73%) հիվանդների մոտ, ովքեր ունեցել են AFP մակարդակ <20 նգ/մլ՝ 72,5% զգայունությամբ և սպեցիֆիկությամբ: 95.0%՝ AFP-ի 57.0%-ի և 90.0%-ի համեմատ՝ 20 նգ/մլ կտրվածքի մակարդակով:66 AFP-ի և CTC-ների համադրությունը կարող է բարելավել HCC-ի հայտնաբերումը: Համարվում է, որ 45 CTC-ները առավելություն ունեն AFP-ի նկատմամբ վաղ սկրինինգում: խմբերը.HCC-ի բարձր ռիսկով:Այնուամենայնիվ, մարկերի վրա հիմնված CTC-ների համակցված հայտնաբերումը կարող է մեծացնել դրական արդյունքների տոկոսը:54 Anti-ASGPR և CPS1 հակամարմինների խառնուրդը հասել է 91% CTC հայտնաբերման մակարդակի HCC ունեցող հիվանդների մոտ:63 Zhang et al.օգտագործեց CTC չիպսեր հակամարմիններով ASGPR-ի, P-CK-ի և CPS1-ի դեմ և HCC-ով հիվանդներին առանձնացրեց լյարդի բարորակ հիվանդությունից և ոչ HCC-ով 100%-ով:64 Wang-ի ուսումնասիրությունը հայտնաբերել է EpCAM+ CTC-ների 60%-ը 42 HCC հիվանդների մոտ և հայտնաբերել էական հարաբերակցություն TNM փուլում CTC-ների հաճախականության և քանակի միջև: 65 guo 等 人 发现, 在 afp 水平 <20 ng / ml 的 125/171 (73%) 名 患者 的, CTC 衍生 的 PCR 评分 升高, 敏感性 为 72.5%, 而 95.0%, 而 AFP 在在值为20 նգ/մլ 时的特异性为57.0% 和90.0%։ 65 guo 等 人 发现 在 的 125/171 (73%) 名 患者 ,, ctc 衍生 pcr 评分, 敏感性 为 为 72.5%, 为 95.0%, AFP 在在 截止截止 截止 截止 截止截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止 截止值 截止值 截止值 截止值 截止值 截止值 截止值 截止值 截止值 截止值 57.0% 和 90.0%.65 Guo et al.обнаружили, что у 125/171 (73%) пациентов с уровнем АФП <20 нг/мл показатели ПЦР, полученные с помощью ЦОК, были повышены с чувствительностью 72,5% на уровнем АФП, ինչպես նաեւ զգալի չափով: отсечки Специфичность составляла 20 нг/мл. պարզվել է, որ AFP մակարդակով <20 նգ/մլ 125/171 (73%) հիվանդների մոտ CTC-ից ստացված PCR արժեքները բարձրացել են 72,5% զգայունությամբ և 95,0% սպեցիֆիկությամբ, մինչդեռ AFP-ն եղել է սահմանափակ առանձնահատկություն: եղել է 20 նգ/մլ:մլ կազմել է 57,0% և 90,0%:66 ORP-ի և CTC-ի համադրությունը բարելավում է HCC-ի հայտնաբերումը:Ենթադրվում է, որ 45 CTC-ները գերազանցում են AFP-ին բարձր ռիսկային HCC պոպուլյացիաների վաղ սկրինինգում:Այսպիսով, CTC-դրական և բարձր ռիսկային HCC խմբերի համար CTC թեստը պետք է կանոնավոր կերպով զուգակցվի ուլտրաձայնային և AFP հայտնաբերման հետ:Այնուամենայնիվ, CTC-ները համարվում են ուռուցքի մետաստազների և ռեցիդիվների կարևոր կանխատեսողներ, և CTC-ների հայտնաբերումը ինքնուրույն խորհուրդ չի տրվում որպես ախտորոշիչ գործիք:62 Հետևաբար, CTC-ն կարող է ծառայել որպես ավելի լավ կանխատեսող կենսամարկեր, քան ներկայումս օգտագործվող այլ մարկերներ: Zhou et al-ը պարզել է, որ EpCAM+ CTC-ների և կարգավորող T բջիջների բարձր թվով հիվանդները ցույց են տվել HCC-ի կրկնության ավելի բարձր ռիսկ, քան ցածր թվով CTC-ներով հիվանդները՝ 66,7% ընդդեմ 10,3% կրկնության հարաբերակցությամբ (P <0,001):67 Նմանատիպ հետազոտություն զեկուցվել է Zhong-ի և այլոց կողմից:68 Բացի այդ, Qi-ն պարզել է, որ HCC-ով 112 հիվանդներից 101-ը (90,81%), ներառյալ վաղ փուլի հիվանդները, դրական են եղել CTC-ների համար, և որ շատ փոքր HCC հանգույցներ են հայտնաբերվել 3-ից հետո: մինչև 5 ամիս հետևողականություն: Zhou et al-ը պարզել է, որ EpCAM+ CTC-ների և կարգավորող T բջիջների բարձր թվով հիվանդները ցույց են տվել HCC-ի կրկնության ավելի բարձր ռիսկ, քան ցածր թվով CTC-ներով հիվանդները՝ 66,7% ընդդեմ 10,3% կրկնության հարաբերակցությամբ (P <0,001):67 A: Նմանատիպ ուսումնասիրությունը զեկուցվել է Zhong-ի և այլոց կողմից:68 Բացի այդ, Qi-ն պարզել է, որ HCC-ով 112 հիվանդներից 101-ը (90,81%), ներառյալ վաղ փուլի հիվանդություն ունեցողները, դրական են եղել CTC-ների համար, և որ շատ փոքր HCC հանգույցներ են հայտնաբերվել 3-ից հետո: Հետագա 5 ամիս: Чжоу и др.обнаружили, что у пациентов со повышенным количеством ЦОК EpCAM+ և կարգավորող Т-клеток ризик развития рецидива ГЦК был ավելի շատ, что у пациентов с ниском количеством ЦОК EpCAM+ եւ կարգավորող Т-клеток ризик развития рецидива ГЦК был ավելի շատ, что у пациентов с ниском количеством ЦОК (P60,7%): Zhou et al-ը պարզել է, որ բարձրացված EpCAM+ CTC-ներով և կարգավորող T բջիջներով հիվանդներն ունեին HCC-ի կրկնության ավելի բարձր ռիսկ, քան ցածր CTC-ներով հիվանդները՝ 66,7%՝ ընդդեմ 10,3% (P<0,001)67:Նմանատիպ ուսումնասիրություն իրականացվել է Zhong et al.68. Բացի այդ, Qi-ն պարզել է, որ HCC-ով 112 հիվանդներից 101-ը (90,81%), ներառյալ վաղ հիվանդությամբ հիվանդները, ունեցել են CTC-ներ, և որ շատ փոքր HCC հանգույցներ են հայտնաբերվել 3-ից 5 ամիս հետևելուց հետո: Zhou 等 人 发现, 与 CTC 数量 较 少 的 患者 患者, epcam + ctc 和 调节性 t 细胞 数量 的 患者 患者 患者 患者 的 的 的 的 的 风险 风险 风险 风险 风险 风险 风险 风险 风险 风险 风险 风险 更 风险 风险 风险 更 更, 复发率 分别 为 66.7% 和 10.3% (p <0.001): Zhou 等 人 发现 与 与 CTC 数量 少 的 患者患者, EPCAM + CTC 和 T 细胞 数量 的 患者 发生 HCC 复发 风险 更 为为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 为 10.3% ( p <0.001)………………………….. Чжоу и др.обнаружили, что пациенты с повышенным количеством ЦОК EpCAM+ եւ կարգավորող Т-клеток имели более высокий риск рецидива ГЦК по сравнению с пациентами с меньшим количеством со меньшим количеством со меньшим количеством со меньшим количеством со меньшим количеством со меньшим количеством со меньшим количеством со меньшим количеством ЦОК (1,6%, св. Zhou et al.պարզվել է, որ բարձրացված EpCAM+ CTC-ներով և կարգավորող T բջիջներով հիվանդներն ունեին HCC-ի կրկնության ավելի բարձր ռիսկ՝ համեմատած ավելի քիչ CTC-ներով հիվանդների հետ՝ համապատասխանաբար 66,7% և 10,3% կրկնության մակարդակով (P <0,001):Նմանատիպ ուսումնասիրություն են հայտնել Zhong et al.68 Բացի այդ, Qi-ն պարզել է, որ 112 HCC հիվանդներից 101-ը (90.81%), ներառյալ վաղ հիվանդությամբ հիվանդները, ունեցել են դրական CTC արդյունքներ և հայտնաբերել են շատ փոքր HCC հանգույցներ 3 այցելությունից հետո:Դիտարկում մինչև 5 ամիս:Նրանք նաև CTC-ներ են հայտնաբերել HBV-ով քրոնիկական վարակով 12 հիվանդների մոտ և 5 ամսվա ընթացքում հայտնաբերել փոքր HCC ուռուցքներ 2 CTC-դրական հիվանդների մոտ:69 Այսպիսով, CTC-ները կարող են օգտագործվել HCC-ի կանխատեսման համար, 70, բայց դրանք կարող են ավելի սովորական կերպով օգտագործվել որպես կանխատեսող կենսամարկեր:
Ինչպես cfDNA-ն, այնպես էլ cfRNA-ն ազատվում է արյան մեջ տարբեր համակարգերի միջոցով:Ծայրամասային արյան այս մոլեկուլները ներկայացնում են ծագման քաղցկեղային հյուսվածքը:Ոչ ինվազիվ մեթոդներով հայտնաբերված մարկերների համեմատ՝ cfRNA-ները ավելի դինամիկորեն կարգավորվում են, հյուսվածքներին հատուկ են և առատ են արտաբջջային միջավայրում:71 miRNA-ների (miRNAs) նշանակությունը և ախտորոշիչ արժեքը HCC-ում հաղորդվել է բազմաթիվ հետազոտություններում:ՄիՌՆԹ-ները էնդոգեն ոչ կոդավորող ՌՆԹ-ներ են (ncRNAs), որոնք կարգավորում են տարբեր մոլեկուլային կենսաբանական գործողություններ՝ արգելակելով թիրախային սուրհանդակային ՌՆԹ-ների (mRNAs) թարգմանությունը:ՄիՌՆԹ-ները տեղակայված են էկզոսոմներում պարփակված ապոպտոտիկ մարմիններում, սակայն դրանք կարող են նաև կայունորեն կապվել ծայրամասային արյան շիճուկի սպիտակուցներին և լիպիդներին և կարող են օգտագործվել HCC-ի գնահատման համար:միկրոՌՆԹ-ները ներգրավված են լյարդի վերականգնման, լիպիդային նյութափոխանակության, ապոպտոզի, բորբոքման և HCC-ի զարգացման մեջ:72 Ուռուցքածին miRNA-ները, ինչպիսիք են miR-21, miR-155 և miR-221, լավ հայտնի են HCC-ում:Մասնավորապես, miR-21-ը առանցքային դեր է խաղում արտաբջջային մատրիցում և ֆիբրոզում կոլագենի սինթեզում և խթանում է հեպատոկարցինոգենեզը՝ ակտիվացնելով արյունաստեղծ ցողունային բջիջները:72,73 ուռուցքը ճնշող miRNA-ները HCC-ում ներառում են miRNA-122, miRNA-29, Let-7 ընտանիքը և miRNA-15 ընտանիքը:Let-7 ընտանիքը բաղկացած է բազմաթիվ ուռուցքային ճնշող miRNA-ներից, որոնք ուղղված են RAS ընտանիքին:MiR-15 ընտանիքը ներառում է miR-15a, miR-15b, miR-16, miR-195 և miR-497, որոնք ունեն լրացուցիչ հաջորդականություններ որոշակի mRNA-ների համար:Բացի այդ, երկար չկոդավորող ՌՆԹ-ները (lncRNAs) և շրջանաձև ՌՆԹ-ները (cirRNAs) նույնպես կարևոր են HCC-ի վաղ սկրինինգի համար:lncRNA-ները ներկայացնում են ncRNA-ների ամենալայն դասը, ներառյալ mRNA-ի նմանվող ncRNA-ները և ներգրավված են մարդու բազմաթիվ հիվանդությունների պաթոգենեզում:LncRNA-ները կարգավորիչ դեր են խաղում լյարդի միկրոմիջավայրում և լյարդի քրոնիկ հիվանդություններում:74 CircRNA-ները նաև ncRNA-ների դաս են, որոնք ունեն բազմաթիվ գործառույթներ գեների արտահայտման կարգավորման գործում:Վերջերս circRNA-ները համարվում են HCC-ի ախտորոշիչ գործիքներ:
Շրջանառվող ազատ ՌՆԹ-ն ունի ուշագրավ կայունություն, ներառյալ դիմադրություն ջերմաստիճանին, pH-ին և RNase-ին, ինչը ծայրամասային արյունից fnRNA-ի մեկուսացումը դարձնում է ավելի քիչ հոգնեցուցիչ՝ օգտագործելով ՌՆԹ-ի մաքրման ստանդարտ մեթոդները:Առավել հաճախ օգտագործվող մեթոդները ներառում են NGS, microarray և RT-qPCR:NGS-ը թույլ է տալիս միկրոՌՆԹ-ները չափել ողջ գենոմում:Այնուամենայնիվ, այս մեթոդը թանկ է, և վերլուծությունը ստանդարտացված չէ:Ի հակադրություն, RT-qPCR-ն էժան է, արագորեն ուժեղացնում է նուկլեինաթթուները և առաջարկում է բազմաթիվ առավելություններ, ինչպիսիք են բարձր զգայունությունը, բարձր ճշգրտությունը, ավելի լայն դինամիկ տիրույթը և ավելի քիչ նմուշներ պահանջելը:Միկրոզանգվածները miRNA-ի հայտնաբերման ևս մեկ մեթոդ են, որոնք հիմնված են թիրախային miRNA-ների զգայուն և հատուկ հիբրիդացման վրա՝ լրացուցիչ ԴՆԹ-ի զոնդերով, 75 սակայն միկրոզանգվածի տվյալների վերլուծությունը ժամանակատար է:
Հաղորդվել է, որ շրջանառվող miR-122-ը և Let-7-ը պոտենցիալ օգտակար են բարձր ռիսկային խմբերում վաղ փուլերում HCC-ի, HBV-ի հետ կապված նախաքաղցկեղ հանգույցներով և վաղ փուլի HCC-ով հիվանդների մարկերների ախտորոշման համար:76 Cai et al.պարզել է, որ Let-7 ընտանիքի անդամները (miR-92, miR-122, miR-125b, miR-143, miR-192, miR-16, miR-126 և miR-199a/b) գտնվում են քրոնիկական հիվանդության վտանգի տակ: HCC հեպատիտով հիվանդների մոտ.Let-7 ընտանիքը կարող է ծառայել որպես արդյունավետ փոխնակ բիոմարկեր՝ կանխատեսելու HCC-ի զարգացումը քրոնիկական հեպատիտ C-ի հետ կապված բարձր ռիսկային խմբերում: 77 miR-122-ն ունի բարձր ախտորոշիչ ճշգրտություն լյարդի ցիռոզով հիվանդների մոտ վաղաժամ HCC-ի հայտնաբերման հարցում:78 MiR-107 շրջանառվող շիճուկը նույնպես գնահատվել է HCC-ի վաղ փուլերում, 79 և ցույց է տվել լավ ներուժ բարձր ռիսկային պոպուլյացիաներում:Zhou et al-ը հայտնել է, որ miRNA-ների խումբը (miR-122, miR-192, miR-21, miR-223, miR-26a, miR-27a և miR-801) կարող է տարբերակել HCC-ն քրոնիկ հեպատիտ B-ից (CHB) և ցիռոզից: զգայունությունը կազմել է 79,1% և 75%, իսկ սպեցիֆիկությունը՝ համապատասխանաբար 76,4% և 91,1%:80 HBV-ի հետ կապված HCC-ում մենք պարզեցինք, որ miR150 մակարդակները զգալիորեն նվազել են՝ համեմատած առանց HCC-ի քրոնիկական HBV հիվանդների (զգայունությունը 79.1%, առանձնահատկությունը 76.5%):-224-ը բարձրացել է HCC-ում` համեմատած առողջ վերահսկիչների հետ, և ենթախմբային վերլուծությունները ցույց են տվել ավելի բարձր մակարդակներ HBV-ի հետ կապված HCC-ով հիվանդների մոտ:հեպատիտ B-ի հետ կապված ցիռոզով և HCC-ով հիվանդները հայտնաբերել են siRNA դասակարգիչ, որը պարունակում է յոթ դիֆերենցիալ արտահայտված siRNA-ներ, որոնք կարող են հայտնաբերել HCC տարբեր հսկիչ սարքերում.AUC-ի շրջանակը վաղ զննման ժամանակ ավելի լավն է, քան AFP-ի կամավորները:Նրանք պարզել են, որ չորս miRNAs (miR-1972, miR-193a-5p, miR-214-3p և miR-365a-3p) կարող են տարբերակել HCC ունեցող հիվանդներին HCC չունեցող հիվանդներից:Հինգ գերարտահայտվող miRNAs (miR-122-5p, miR-125b-5p, miR-885-5p, miR-100-5p և miR-148a-3p) համարվում են պոտենցիալ HBV վարակներ HCC, ցիռոզ և CHB բիոմարկերներում, հատկապես: miR-34a-5p-ը կարող է լինել լյարդի ցիռոզի կենսամարկեր,85 և կարող է լինել պոտենցիալ բիոմարկեր բարձր ռիսկային պոպուլյացիաներում HCC-ի վաղ սկրինինգի համար:HCC-ում ամենաշատ ուսումնասիրված lncRNA-ն բարձր ակտիվանում է լյարդի քաղցկեղի (HULC) դեպքում:Այլ ուսումնասիրություններ ցույց են տվել, որ HULC-ը, որը շրջանառվում է HCC հիվանդների մոտ, կարող է օգտագործվել որպես ախտորոշիչ մարկեր, քանի որ այս lncRNA-ն խիստ վերկարգավորված է HCC հիվանդների մոտ՝ համեմատած առողջ անհատների հետ:71,86 Ի թիվս այլ lnRNA-ների, LINC00152-ը համարվում է լավագույն ախտորոշիչ lncRNA-ն իր բարձր AUC-ի, զգայունության և յուրահատկության շնորհիվ:86 Մեկ ուսումնասիրության ժամանակ LINC00152-ի ծայրամասային արյան արտահայտումը աստիճանաբար ավելացել է նորմալ առողջ վերահսկիչներից մինչև CHB և ցիռոզով հիվանդներ, և վերջապես ամենաբարձրն է եղել HCC-ում:CircSMARCA5-ի արտահայտման ուսումնասիրությունները HCC-ով հիվանդների պլազմայում ցույց են տվել HCC-ի արտահայտման աստիճանական նվազում՝ սկսած հեպատիտից մինչև ցիռոզ և նախաքաղցկեղային վնասվածքներ:87 ROC կորերի վերլուծությունը հաստատեց այս circRNA-ների պոտենցիալը հեպատիտով կամ լյարդի ցիռոզով հիվանդներին տարբերելու HCC ունեցողներից, հատկապես նրանցից, որոնց AFP մակարդակը 200 նգ/մլ-ից ցածր է:Բացի այդ, Չժուն վերլուծել է 13617 ցիկլային ՌՆԹ-ներ HBV-ի հետ կապված HCC հիվանդների պլազմայի նմուշներում և հաստատել, որ 6 ցիկլային ՌՆԹ-ները տարբեր կերպ են արտահայտվել HCC-ի և HBV-ի հետ կապված ցիռոզում, ինչը ենթադրում է, որ cRNA-ները կարող են օգտակար լինել:բարձր ռիսկային խմբերի վաղ սկրինինգի մարկերներ, ինչպիսիք են լյարդի հիվանդության, սկլերոզով հիվանդների հետ կապված:88
Էկզոսոմները 40–160 նմ տրամագծով թաղանթային վեզիկուլներ են;բազմաթիվ ներբջջային վեզիկուլներ միաձուլվում են բջջային թաղանթի հետ և ազատվում են արտաբջջային մատրիցում:Դրանք պարունակում են բազմաթիվ ակտիվ բաղադրիչներ, այդ թվում՝ լիպիդներ, սպիտակուցներ, ՌՆԹ և ԴՆԹ, և առանցքային դեր են խաղում բջիջների՝ ինչպես HCC, այնպես էլ ոչ HCC բջիջների միջև հաղորդակցության մեջ:89,90 Էկզոսոմները կարգավորում են HCC-ի առաջընթացը՝ ակտիվացնելով հեպատոցիտների ֆիբրոբլաստները և աստղային բջիջները, իմունային բջիջները, նորմալ հեպատոցիտները և HCC բջիջները:91 Ուռուցքային միկրոմիջավայրում ուռուցքային բջիջները արտադրում են մեծ թվով էկզոսոմներ, որոնք տեղափոխվում են քաղցկեղի բջիջներից մինչև հասուն բջիջներ, որոնք իրենց հերթին մասնակցում են օնկոգենեզին, դեգրադացմանը և բջջային ազդանշաններին:92 Ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ էկզոսոմները պաթոլոգիական պրոցեսների ընթացքում կարող են օնկոգեններ փոխանցել նորմալ բջիջներին, ինչը կարող է լինել ուռուցքի ներխուժման և մետաստազիայի մեխանիզմներից մեկը:93 Էկզոսոմների դերը քաղցկեղի առաջընթացի մեջ կարող է լինել դինամիկ և հատուկ քաղցկեղի տիպին, 89 Էկզոսոմները կարող են ինտերնալիզացվել հարակից կամ հեռավոր բջիջների կողմից՝ կարգավորելու բազմաթիվ թիրախային գեներ ստացող բջիջներում, որոնք կարող են ներգրավված լինել միջբջջային հաղորդակցության իոնների և բջջային միկրոմիջավայրի փոխազդեցությունների մեջ: միջնորդում է բջջային ազդանշանը և նյութափոխանակությունը:94 Էկզոսոմային բեռների մոլեկուլների բնութագրերն ու դինամիկ փոփոխություններն ուղղակիորեն արտացոլում են ծնողական ուռուցքային բջիջների բնութագրերն ու դինամիկ փոփոխությունները95, ինչը նաև հիմք է հանդիսանում էկզոսոմների օգտագործման համար քաղցկեղի ախտորոշման և կանխատեսման, ինչպես նաև հակաքաղցկեղային թերապիայի անհատական ​​արձագանքի կանխատեսման համար։ ..96
Էկզոսոմների մեկուսացման և վերլուծության ավանդական լաբորատոր մեթոդները բարդ են, բազմաքայլ և ժամանակատար, ներառյալ ուլտրակենտրոնացումը, ֆիլտրացումը, չափի բացառման քրոմատոգրաֆիան, իմունաաֆինիտի մաքրումը, Western blotting, ֆերմենտային կապակցված իմունոսորբենտային անալիզը (ELISA), PCR վերլուծությունը և հոսքը:Մանրացված համակարգերը և միկրո/նանոտեխնոլոգիան օգտագործող լաբորատոր պլատֆորմները լայնորեն մշակվում են էկզոսոմների տեղում արագ և հարմար մեկուսացման համար:Նանոմասնիկների հետագծման վերլուծությունը (NTA) լայնորեն օգտագործվող մեթոդ է էկզոսոմների չափը և կոնցենտրացիան բնութագրելու համար, ներառյալ այնպիսի մեթոդներ, ինչպիսիք են մագնիսական նանոմասնիկները և պոլիհիդրօքսիալկանոատները:Միկրոհեղուկ և էլեկտրաքիմիական մեթոդները կարող են նաև արագորեն հայտնաբերել էկզոսոմները բարձր ելքի դեպքում:
Էկզոսոմային սպիտակուցները կարևոր մարկերներ են HCC-ի ախտորոշման համար:Arbelaiz-ի ուսումնասիրության մեջ 98 RasGAP SH3 կապող սպիտակուցի (G3BP) և պոլիմերային իմունոգոլոբուլինի ընկալիչի (PIGR) մակարդակը զգալիորեն բարձրացել է HCC-ից ստացված էկզոսոմներում, և երկու սպիտակուցների ենթադրյալ համակցված արդյունավետությունը գերազանցում է AFP-ին:Երկաթի գերբեռնվածությունը կարևոր գործոն է, որը նպաստում է HCC-ի զարգացմանը:Ցենգը հայտնել է, որ հեպցիդինը կարող է առանցքային դեր խաղալ HCC-ի նկատմամբ դիմադրության գործում:99 HCC հիվանդների շիճուկներից ստացված էկզոսոմներն ունեին հեպցիդինի mRNA տարբերակների կրկնօրինակների զգալիորեն ավելի մեծ քանակ, քան նրանց առողջ գործընկերները, ինչը ենթադրում է, որ հեպցիդինը կարող է լինել նոր ախտորոշիչ կենսամարկեր HCC-ի համար:100 HCC-ով արտադրված էկզոսոմներում 14-3-3ζ սպիտակուցը կարող է նվազեցնել T բջիջների ակտիվացումը, տարածումը և տարբերակումը և կարող է դրդել T բջիջների փոխակերպումը կարգավորող T բջիջների, ինչը հանգեցնում է T բջիջների սպառմանը:101 Սա հաստատված է մի քանի ուսումնասիրություններով, որոնք ուսումնասիրում են իմունային հսկողության արդյունքում ուռուցքից խուսափելը, 102, ինչը կարող է նպաստել HCC ուռուցքի առաջացմանը:
Պլազմայում կամ շիճուկում էկՌՆԹ-ի առկայությունից բացի, ՌՆԹ-ով հարստացված էկզոսոմները կարող են օգտագործվել ոչ ինվազիվ իրական ժամանակում բեմադրելու համար՝ ուռուցքի վաղ սկրինինգում և որոշել ուռուցքի էվոլյուցիան և արձագանքը թերապիային:Էկզոսոմային miRNA-21-ի մակարդակը արյան շիճուկում HCC խմբում 2,21 անգամ ավելի բարձր է եղել, քան CHB խմբում, իսկ HCC խմբում՝ 5,57 անգամ, քան առողջ բնակչությանը:Wang-ի ուսումնասիրության մեջ էկզոսոմները զգալիորեն ավելացրել են HCC-ն՝ համեմատած ցիռոզով հիվանդների հետ, որոնց AUC արժեքները կազմում են 0,83 (95% CI 0,74–0,93) և 0,94 (95% CI 0,88–1,00):104 Ստացված տվյալները պարզեցին հատուկ էկզոսոմային բեռների մոլեկուլների ներգրավվածությունը օնկոգենեզի և HCC-ի առաջընթացի կարգավորման մեջ:105 miR-221, miR-103, miR-181c, miR-181a, miR-93 և miR-26a շիճուկային արտահայտությունը համահունչ է:և մետաստազները, և miR21 մակարդակները շատ ավելի բարձր էին HCC հիվանդների մոտ, քան առողջ հսկիչների և նաև CHB հիվանդների մոտ:102 LncRNA-ն ուներ պոտենցիալ ախտորոշիչ արժեք HCC-ում:Հետազոտությունները ցույց են տվել, որ HCC հիվանդների շիճուկներից ստացված էկզոսոմներն ունեն LINC00161, LINC000635 և lncRNA-ի զգալիորեն ավելի բարձր մակարդակներ, որոնք ակտիվանում են վերափոխելով աճի գործոն-β, քան առանց HCC հիվանդների, և այս lncRNA-ները խիստ կապված են TNM փուլի և ուռուցքի ծավալի հետ:110 Conigliaro et al.Պարզվել է, որ CD90+ էկզոսոմներն արտահայտում են lncRNAH19-ի բարձր մակարդակ, ինչը զգալիորեն մեծացնում է անոթային էնդոթելիային աճի գործոնի (VEGF) թողարկումը և VEGF-R1 ընկալիչների արտադրությունը՝ դրանով իսկ խթանելով անգիոգենեզը:93 CircRNA-ները էկզոսոմային ncRNA-ների մեկ այլ տեսակ են, որոնք արտահայտվում են տեսակների մեջ ավելի ցածր, բայց կայուն մակարդակներում, circRNA-ները նաև հատուկ են բջիջների տեսակին, հյուսվածքի տեսակին, զարգացման փուլին և կարգավորող գործունեությանը:111 circRNA-ները վաղ և նվազագույն ինվազիվ քաղցկեղի ախտորոշիչ կենսամարկերներ են:112 Վերջին կլինիկական փորձարկումները ցույց են տվել, որ անհատական ​​miRNA-ների առանձնահատկությունը HCC-ի կանխատեսման հարցում իդեալական չէ:Հետևաբար, բազմակի անալիզների միջոցով բարդ հայտնաբերումը (օրինակ՝ miR-122 և miR-48a AFP-ի հետ համատեղ) կարող է բարելավել HCC-ի վաղ նույնականացումը և HCC-ի տարբերակումը ցիռոզից:100
CHB-ով և լյարդի ցիռոզով հիվանդները HCC-ի զարգացման ամենատարածված բարձր ռիսկային խումբն են:Բարձր ռիսկային խմբերի համար, երբ կայուն վիրուսաբանական պատասխանը ձեռք բերվի, պետք է մշակվի HCC ռիսկի վրա հիմնված ծախսարդյունավետ հսկողության ռազմավարություն, և վաղ սկրինինգը հիմնական ծախսարդյունավետության բարձր հարաբերակցությամբ HCC ախտորոշման և բուժման բարելավման բանալին է2: ..Քաղցկեղի վաղ սկրինինգի մեթոդներն ունեն բազմաթիվ սահմանափակումներ. վաղ սկրինինգի արդյունավետ մեթոդներ չեն մշակվել քաղցկեղի տեսակների մեծ մասի համար, և հետևողականությունը սովորաբար ցածր է:Ավանդական վաղ սկրինինգի մեթոդների համեմատ՝ հեղուկ բիոպսիայի տեխնոլոգիան ակնհայտ առավելություններ ունի՝ նմուշառման հեշտություն, panrac-ի հայտնաբերում, նմուշների լավ վերարտադրելիություն և արդյունավետ արձագանք ուռուցքի տարասեռությանը:Հաշվի առնելով հեղուկ բիոպսիայի հետ կապված մեթոդների ծախսարդյունավետությունը, դրանց օգտագործումը HCC-ի սկրինինգում կանոնավոր կերպով չի փորձարկվել:Չնայած մոլեկուլային մակարդակում ճշգրիտ հայտնաբերման առաջընթացին, հեղուկ բիոպսիան թանկ է թիրախային հիվանդների մոտ HCC-ի հայտնաբերման համար՝ սահմանափակելով դրա լայն կիրառությունը՝ համեմատած հատուկ պատկերավորման պրոցեդուրաների հետ, ինչպիսիք են ուլտրաձայնը և մագնիսական ռեզոնանսային պատկերումը:113,114 Այնուամենայնիվ, նախորդ ուսումնասիրությունը ցույց է տվել, որ հեղուկ բիոպսիան զգալի օգուտ է ցույց տվել որակով ճշգրտված կյանքի տարիների (QALYs) առումով:115 Հեղուկ բիոպսիայի օգուտները նույնպես ցույց են տվել ստամոքսի և քիթ-կոկորդի վաղ քաղցկեղի դեպքում:116,117 Ընթացիկ տեսակետն այն է, որ հեղուկ բիոպսիան կարող է լրացնել շիճուկի կենսամարկերները և ճառագայթային զննումը ուռուցքների հայտնաբերման և ախտորոշման գործում:117 118
Համաձայն ընթացիկ գրականության, հեղուկ բիոպսիայի տեխնոլոգիան զգալիորեն ավելի բարձր զգայունություն և սպեցիֆիկություն է ցույց տվել լյարդի քաղցկեղի բարձր ռիսկային խմբերի վաղ սկրինինգում:Անկախ հեղուկի բիոպսիայի տեսակից, այն կարող է տարբերակել HCC-ն առանց HCC-ի բարձր ռիսկային անձանցից՝ ենթադրելով վաղ սկրինինգի կարևորությունը, քանի որ բարձր ռիսկային և առողջ անհատների միջև տարբերություններն ակնհայտ են:ctDNA-ն ունի կարճ կիսամյակ և կարող է օգտագործվել HCC-ի հայտնաբերման համար, ուստի ուռուցքից ստացված cDNA-ի ցանկացած փոփոխություն կարող է իրական ժամանակում ապահովել ուռուցքի առաջընթացի կոնկրետ ապացույցներ, հատկապես փոքր ուռուցքների համար:ctDNA-ի բարձր մակարդակը վկայում է քաղցկեղի զարգացման և տարածման մասին և հանդիսանում է առաջընթացի և կրկնության վաղ ցուցիչ:Բացի այդ, ctDNA-ի արդյունքների հիման վրա հիվանդները կարող են ստանալ անհատական ​​բուժում և հսկողություն:119 Հատուկ մեթիլացման վայրերը կարող են ավելի լավ մարկեր լինել, քան AFP-ն՝ HCC-ի և ցիռոզային հանգույցների վաղ հայտնաբերման համար:HCC-ի վիրահատելի դեպքերում cDNA-ի բարձր մակարդակները վկայում են միկրոանոթային ներխուժման և հետվիրահատական ​​ռեցիդիվների և մետաստազների մասին:Պատճենների քանակի փոփոխությունները կապված են HCC-ով հիվանդների գոյատևման հետ:Կարելի է ենթադրել, որ cDNA-ի գնահատումը կարող է ներգրավված լինել HCC-ի ընդհանուր բուժման մեջ, և cDNA-ն կարող է ծառայել որպես թերապևտիկ մոդուլյացիայի արդյունավետ ցուցիչ:ctDNA-ի հատուկ գենետիկ մուտացիաների վրա հիմնված մարկերներ ընդունվել են կլինիկական ուղեցույցներով՝ կանխատեսելու արդյունավետությունը և վերահսկելու դեղերի դիմադրողականությունը:ctDNA թեստը կարող է լինել հեղուկ բիոպսիայի ամենաօգտակար գործիքը վաղ սկրինինգի համար:CTC-ները նաև առանցքային դեր են խաղում բարձր ռիսկային HCC խմբերի վաղ սկրինինգում:HCC-ի հետ կապված CTC-ների տարբեր մարկերներ առանձնահատուկ նշանակություն ունեն HCC-ի առաջացման, զարգացման և կրկնության մեջ:Որպես թաղանթային վեզիկուլներ՝ էկզոսոմները ներգրավված են միջբջջային հաղորդակցության մեջ, հատկապես՝ HCC բջիջներում։Շրջանառվող միկրոՌՆԹ-ները կայուն են արյան մեջ և, հետևաբար, կարող են ավելի օգտակար լինել HCC-ի վաղ սկրինինգի համար:Աստիճանաբար հայտնաբերվեցին էկզոսոմային սպիտակուցներ և ՌՆԹ-ով հարուստ էկզոսոմներ, և հաստատվեց դրանց կանխատեսող արդյունավետությունը HCC-ի համար:Հետաքրքիր է, որ HCC-ի տարբեր էթոլոգիաները կարող են նաև կապված լինել տարբեր մուտացիաների հետ, այնպես որ մենք կարող ենք ընտրել տարբեր կենսամարկերներ վաղ սկրինինգի համար՝ հիմնվելով HCC-ի տարբեր պատճառաբանությունների վրա:120
Այնուամենայնիվ, հեղուկի բիոպսիայի ներկայիս մեթոդները կասկածելի են կայունության առումով և չեն կարող ինքնուրույն կատարել HCC-ի վաղ սկրինինգ կամ մոնիտորինգ, բայց դեռ կարող են լրացնել անհատական ​​զննումն ու ախտորոշումը:121 Որպես հեղուկ բիոպսիայի ձև, ctDNA, CTC, cfRNA և էկզոսոմի հետ կապված AFP-ի կամ PIVKA-II-ի հայտնաբերումն ու պատկերումը խոստումնալից կիրառություն ունեն HCC-ի վաղ ախտորոշման և կանխատեսման մեջ:Այնուամենայնիվ, արյան մեջ ctDNA-ի արտազատման ճշգրիտ մեխանիզմը դեռևս պետք է պարզվի:ctDNA-ի հիմնական կենսաբանական հատկությունների բացահայտումը կարող է հեշտացնել դրա օգտագործումը որպես մարկեր:Շրջանառության մեջ ctDNA-ի փոքր քանակությունը և նմուշների հետ աշխատելու խիստ պահանջները մարտահրավեր են HCC-ում cDNA-ի հայտնաբերման կլինիկական իրականացման համար:Բացի այդ, գենետիկ մուտացիաները չունեն հատուկ առանձնահատկություններ, որոնք թույլ են տալիս ճշգրիտ նույնականացնել քաղցկեղածինները:Քանի որ բազմաթիվ գենետիկ և սոմատիկ տարբերակներ կան նաև նորմալ հյուսվածքներում, հեղուկ բիոպսիայով հայտնաբերված գենետիկ մուտացիաները կարող են սահմանափակ օգտակար լինել HCC-ի վաղ սկրինինգում:122 Հստակ սահմանված օգտակար գենային թիրախների և կենսամարկերների սահմանափակումները, որոնք օգնում են cDNA-ն տարբերել ոչ ուռուցքային ԴՆԹ-ից, cDNA-ի օգտագործման ամենակարևոր խնդիրներն են:CTC-ների հայտնաբերման համար զգայուն և հատուկ մարկերների օգտակարության բացակայությունը:Հայտնաբերվել են միայն մետաստատիկ պոտենցիալով կենսունակ բջիջներ, և CSC հարստացված մարկերների օպտիմալ համակցությունը պարզ չէ:CTC-ների մեկուսացումը մշակույթի համար և դրանց մուտացիոն պրոֆիլների գնահատումը նույնպես դժվար խնդիր է:Էկզոսոմների նույնականացման, մեկուսացման և մաքրման հետ կապված խնդիրների պատճառով կոնկրետ մոլեկուլային մեխանիզմը դեռևս պարզ չէ, և էկզոսոմների և HCC մեխանիզմի վերաբերյալ նախորդ ուսումնասիրությունները խորը չեն եղել, ինչպես նաև miRNA-ների, lncRNA-ների և սպիտակուցների տեսակավորումը էկզոսոմների մեջ: , և պարզ չէ, թե արդյոք էկզոսոմների կլանումը հատուկ տիպի գործընթաց է:Էկզոսոմների օգտագործումը HCC-ի ախտորոշման և բուժման համար դեռևս նախակլինիկական փուլում է:Հեղուկ բիոպսիայի պրոցեդուրաների ստանդարտացման բացակայությունը, ինչպիսիք են արյան հավաքման համար օգտագործվող խողովակների տեսակը, արյան ծավալը, նմուշների պահպանումը և հայտնաբերումը, մեկուսացումը և հարստացումը, կարող է բացառել դրանց օգտագործումը սովորական կլինիկական պրակտիկայում՝ բժշկական կենտրոնների տարբեր պրակտիկաների տարբերության պատճառով:Հեղուկ բիոպսիայի արդյունավետությունը HCC-ի վաղ սկրինինգի, ախտորոշման, արդյունավետության գնահատման և կանխատեսման գործում դեռ պետք է ուսումնասիրվի, հատկապես բարձր ռիսկային խմբերի համար:Հեղուկ բիոպսիայի տեխնոլոգիան մեծ ներուժ ունի և ակնկալվում է, որ մոտ ապագայում լայնորեն կկիրառվի լյարդի քաղցկեղի կլինիկական պրակտիկայում:
1. Sung H., Furley J., Siegel RL et al.Քաղցկեղի համաշխարհային վիճակագրություն 2020. GLOBOCAN-ը գնահատում է քաղցկեղի 36 տեսակների դեպքերը և մահացությունը 185 երկրներում:CA քաղցկեղ J Clin.2021; 71 (3): 209-249:doi՝ 10.3322/caac.21660
2. Առողջապահության ազգային հանձնաժողովի շտաբ.Լյարդի առաջնային քաղցկեղի ախտորոշման և բուժման չափանիշներ (2022 հրատարակություն) [J]:Կլինիկական լյարդի հիվանդությունների ամսագիր, 2022, 38 (2): 288-303:doi՝ 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.009
3. Zhou J, Sun H, Wang Z, et al.Ուղեցույցներ հեպատոցելուլյար քաղցկեղի ախտորոշման և բուժման համար (2019 հրատարակություն):Լյարդի քաղցկեղ.2020; 9 (6): 682-720:doi՝ 10.1159/000509424
4. Kokudo N, Takemura N, Hasegawa K, et al.Կլինիկական պրակտիկայի ուղեցույցներ լյարդային քաղցկեղի համար. Լյարդի հիվանդությունների ճապոնական միություն, 2017 (JSH-HCC 4-րդ ուղեցույց), 2019 թ.Լյարդի հիվանդության ջրամբար.2019; 49 (10): 1109–1113:doi:10.1111/hepr.13411
5. Barrera-Saldana HA, Fernandez-Garza LE, Barrera-Barrera SA Հեղուկ բիոպսիա լյարդի քրոնիկ հիվանդության ժամանակ:Անն Հեպատո.2021; 20:100197.doi:10.1016/j.aohep.2020.03.008
6. Tai TKYu., Tan P.Kh.Կրծքագեղձի քաղցկեղի հեղուկ բիոպսիա. կենտրոնացված վերանայում.Arch Pathol Lab Med.2021; 145 (6): 678–686:doi՝ 10.5858/arpa.2019-0559-ՀՀ
7. Kanval F., Singal AG Surveillance for hepatocellular carcinoma. ընթացիկ լավագույն փորձը և ապագա ուղղությունները:Գաստրոէնտերոլոգիա.2019; 157 (1): 54-64.doi:10.1053/j.gastro.2019.02.049
8. Եվրոպական հետազոտական ​​ասոցիացիա L, Եվրոպական կազմակերպություն R, C Therapeutics:Կլինիկական ուղեցույցներ EASL-EORTC. հեպատոցելուլյար քաղցկեղի բուժում:J Հեպարին.2012; 56 (4): 908–943:doi:10.1016/j.jhep.2011.12.001
9. Zhang G., Ha SA, Kim HK et al.AFP-ի և HCCR-1-ի համակցված վերլուծություն՝ որպես օգտակար շճաբանական մարկերներ փոքր լյարդաբջջային քաղցկեղի դեպքում. հեռանկարային կոհորտային ուսումնասիրություն:Դիս Մարկ.2012; 32 (4): 265-271:doi՝ 10.3233/DMA-2011-0878
10. Չեն Ս, Չեն Հ, Գաո Ս և այլն:Պլազմային միկրոՌՆԹ-125b-ի դիֆերենցիալ արտահայտությունը հեպատիտ B վիրուսի հետ կապված լյարդի հիվանդության և հեպատիտ B վիրուսով առաջացած հեպատոցելուլյար քաղցկեղի ախտորոշիչ ներուժի դեպքում:Լյարդի հիվանդության ջրամբար.2017; 47 (4): 312-320:doi:10.1111/hepr.12739
11. Halle PR, Foster F., Kudo M. et al.Ալֆա-ֆետոպրոտեինի կենսաբանությունը և նշանակությունը հեպատոցելուլյար քաղցկեղում.Լյարդի ինտ.2019; 39 (12): 2214–2229:doi՝ 10.1111/liv.14223
12. Omata M, Cheng AL, Kokudo N, et al.Ասիա-խաղաղօվկիանոսյան տարածաշրջանում հեպատոցելուլյար քաղցկեղի բուժման կլինիկական ուղեցույցներ. 2017 թ.Լյարդի հիվանդությունների միջազգային կազմակերպություն.2017; 11 (4): 317–370:doi՝ 10.1007/s12072-017-9799-9
13. Xu Fei, Zhang Li, He Wei et al.Շիճուկի PIVKA-II-ի ախտորոշիչ արժեքը միայնակ կամ AFP-ի հետ համակցված հեպատոցելուլյար քաղցկեղով չինացի հիվանդների մոտ:Դիս Մարկ.2021; 2021: 8868370.doi: 10.1155/2021/8868370
14. Durin L., Praradines A., Basset S. et al.Թոքերի ոչ մանր բջջային քաղցկեղի ոչ պլազմային հումորալ հեղուկի բիոպսիա. ավելի մոտ է ուռուցքին:բջիջ.2020; 9 (11).doi՝ 10.3390/բջիջներ9112486
15. Mader S, Pantel K. Հեղուկ բիոպսիա. ներկա կարգավիճակը և ապագա հեռանկարները:Բուժում Oncol Res.2017; 40 (7-8): 404-408:doi՝ 10.1159/000478018
16. Palmirotta R, Lovero D, Cafforio P, et al.Հեղուկի վրա հիմնված քաղցկեղի բիոպսիա. մուլտիմոդալ ախտորոշիչ գործիք կլինիկական ուռուցքաբանության մեջ:The Adv Med Oncol.2018; 10:1758835918794630.doi: 10.1177/1758835918794630
17. Mandel P., Metais P. Nucleic acids in human plasma.CR Seances Soc Biol Fil.1948; 142 (3-4): 241-243:
18. Mouliere F, Chandrananda D, Piskorz AM, et al.Շրջանառվող ուռուցքային ԴՆԹ-ի առաջադեմ հայտնաբերում բեկորների չափի վերլուծությամբ:Գիտությունը թարգմանում է բժշկությունը:2018; 10:466.doi:10.1126/scitranslmed.aat4921
19. Underhill HR, Kitzman JO, Hellwig C. et al.Շրջանառվող ուռուցքի ԴՆԹ-ի հատվածի երկարությունը:PLOS գեներ.2016; 12 (7): e1006162:doi:10.1371/journal.pgen.1006162
20. Cheng F, Su L, Qian C. Շրջանառվող ուռուցքային ԴՆԹ. խոստումնալից բիոմարկեր հեղուկի վրա հիմնված քաղցկեղի բիոպսիայում:թիրախային ուռուցք.2016; 7 (30): 48832–48841:doi:10.18632/oncotarget.9453
21. Bettegovda S., Sauzen M., Leary RJ et al.Շրջանառվող ուռուցքային ԴՆԹ-ի հայտնաբերումը մարդու չարորակ նորագոյացությունների վաղ և ուշ փուլերում.Գիտությունը թարգմանում է բժշկությունը:2014; 6 (224): 224ra24.doi:10.1126/scitranslmed.3007094
22. Mehes G. Հեղուկ բիոպսիա պինդ քաղցկեղի մուտացիոն կանխատեսող վերլուծության համար. պաթոլոգի տեսակետը:J Կենսատեխնոլոգիա.2019; 297:66-70.doi: 10.1016/j.jbiotec.2019.04.002
[PubMed] 23. Lenarts L, Tuveri S, Yatsenko T, et al.Ուռուցքի վաղ հայտնաբերում շրջանառվող պլազմայի ԴՆԹ-ի սքրինինգի միջոցով. հիա՞պ, թե՞ հույս:Բելգիայի կլինիկական օրենք.2020 թ.75(1):9-1 doi:10.1080/17843286.2019.1671653
24. Nishida N. Հեպատիտի վիրուսի և ծերացման ազդեցությունը ԴՆԹ-ի մեթիլացման վրա մարդու հեպատոկարցինոգենեզում:Հիստոպաթոլոգիա.2010; 25 (5): 647–654:doi՝ 10.14670/HH-25.647